酶联免疫检测的几种方法及其原理

来源：学生作业帮助网编辑：作业帮时间：2024/05/02 06:45:36

酶联免疫检测的几种方法及其原理
酶联免疫检测的几种方法及其原理

酶联免疫检测的几种方法及其原理
（1）酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）：是将抗原或抗体吸附在固相载体表面.使抗原抗体反应在固相载体表面进行.可用间接法、双抗体夹心法或竞争法测定抗原或抗体.
（2）夹心法（sandwich assay）:将已知的特异抗体包装在固相载体（塑料板凹孔或纸片上）,加入待检标本,标本中的抗原即可与载体上的抗原结合,洗去未结合的材料后加入该抗原的酶标记抗体,洗去未结合的酶标抗体,加底物显色,用酶免疫检测仪测量颜色的光密度,可定量测定抗原.
　　间接法（indirecr ELISA）常用于检查特异抗体.先将已知特异抗原包被固相载体,加入待检标本（可能含有相应抗体）,再加入酶标抗Ig的抗全（即第二抗体）,经加底物显色后,根据颜色的光密度计算出标本中抗体的含量.
（3）BAS-ELISA：近年来对酶免设分析法的改进是使用生物素-亲合素-过氧化物酶复合物作为指示剂,组成一新的生物放大系统进一步提高检测的敏感度.可用来检测多种抗原抗体系统如细菌、病毒、肿瘤细胞表面抗原等.一个亲合素（avidin）分子可以结合4个生物素分子（biotin）.结合非常稳定.亲合素和生物素都可与抗全、酶、荧光素等分子结合,而不影响后者的生物活性.一个抗体分子可偶联90个生物素分子,通过生物素又可连接多个亲合素.因此大提高检测的敏感度.目前应用生物-酶标亲合素系统（biotinavidin system- ELISA,BAS-ELISA）,它是通过生物素标记抗体连接免疫反应系统,同时借助生物素化酶或酶标亲合素引入酶与底物反应系统.

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