作业帮PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
来源：学生作业帮助网 编辑：作业帮 时间：2024/05/17 07:04:02
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?
师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
建议与marker一起跑电泳,如果marker跑出的带是完整的,而模板DNA有拖尾、弥散等,就基本可以确定模板DNA降解了；如果marker跑出的带也是弥散的,那可能是琼脂糖质量不好,或者是电泳Buffer不好,建议换琼脂糖、重配Buffer.
电压怎样，太大会溶胶，太小会跑太慢。或者跑过了。
含有溴酚蓝的loading buffer的配比有问题，其中的甘油量，可能过少，致使密度不大，没有使样品沉降到点样孔中。
Buffer加有SDS的量不对，没有除尽的聚合酶，影响DNA双链的迁移速率。
我做的时候也有没分开，是因为电压的问题（机器太老了，又没有守在旁边，断电了）。...
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电压怎样，太大会溶胶，太小会跑太慢。或者跑过了。
含有溴酚蓝的loading buffer的配比有问题，其中的甘油量，可能过少，致使密度不大，没有使样品沉降到点样孔中。
Buffer加有SDS的量不对，没有除尽的聚合酶，影响DNA双链的迁移速率。
我做的时候也有没分开，是因为电压的问题（机器太老了，又没有守在旁边，断电了）。
收起
1.样品有降解
2.EB染色不够
PCR产物凝胶电泳不理想是怎么回事?师姐在二月做了一次,我在五月重复了很多次都不理想,许多条带跑不出来.问一下是不是多次冻融模板DNA降解了.
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